核酸檢測的物質(zhì)是病毒的核酸。核酸檢測是查找患者的呼吸道標(biāo)本、血液或糞便中是否存在外來入侵的病毒的核酸,來確定是否被新冠病毒感染。因此一旦檢測為核酸“陽性”,即可證明患者體內(nèi)有病毒存在 。新冠病毒感染人體之后,首先會在呼吸道系統(tǒng)中進(jìn)行繁殖,因此可以通過檢測痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判斷人體是否感染病毒。 所以說,核酸檢測陽性可以作為新型冠狀病毒感染確診的新標(biāo)準(zhǔn)。
一、核酸檢測原理:
1、所有生物都含有核酸,核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),新型冠狀病毒是一種僅含有RNA的病毒,病毒中特異性RNA序列是區(qū)分該病毒與其它病原體的標(biāo)志物。
2、新型冠狀病毒出現(xiàn)后,我國科學(xué)家在極短的時間里完成了對新型冠狀病毒全基因組序列的解析,并通過與其它物種的基因組序列對比,發(fā)現(xiàn)了新型冠狀病毒中的特異核酸序列。
3、臨床實驗室檢測過程中,如果能在患者樣本中檢測到新型冠狀病毒的特異核酸序列,應(yīng)提示該患者可能被新型冠狀病毒感染。
二、新型冠狀病毒核酸檢測原理:
1、檢測新型冠狀病毒特異序列的方法最常見的是熒光定量PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。因PCR反應(yīng)模板僅為DNA,因此在進(jìn)行PCR反應(yīng)前,應(yīng)將新型冠狀病毒核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為DNA。
2、在PCR反應(yīng)體系中,包含一對特異性引物以及一個Taqman探針,該探針為一段特異性寡核苷酸序列,兩端分別標(biāo)記了報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;如反應(yīng)體系存在靶序列,PCR反應(yīng)時探針與模板結(jié)合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解,報告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,發(fā)出熒光。
3、每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)(Ct值)與病毒核酸濃度有關(guān),病毒核酸濃度越高, Ct值越小。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽性判斷值。