隨著疫情防控的常態(tài)化,一輪又一輪的大規(guī)模高強度核酸檢測篩查讓核酸提取工作人員叫苦不迭,一款全自動化的設備代替人工是必然的趨勢。自動化核酸提取時代,各種品牌的核酸提取儀器爭相上市,爭奇斗艷地宣稱著自家繁雜奇特的工藝設計,亦或花樣百出的功能差異。而眼光犀利如我們,透過層層浮華迷霧看向其本質,核酸提取,最重要的是什么?
——當然是穩(wěn)定,穩(wěn)定,還是穩(wěn)定!
俗話說根基不穩(wěn),地動山搖。只有穩(wěn)定性有保障,客戶才能放心選擇,把核酸提取這個要求嚴格,步驟繁瑣的神圣工作安心交付給智能化儀器。友康全自動核酸提取儀的穩(wěn)定性可不是重量上的穩(wěn)定,而是任你不同高低濃度的病毒,任你在不同孔道的地盤上,我的檢測精確性穩(wěn)若泰山巋然不動。
于是友康開展了以下科學嚴密的實驗,用事實與數據來驗證友康全自動核酸提取工作站的穩(wěn)定性——
全自動樣本處理與核酸提取工作站提取性能檢測
一:實驗目的
1、 評價友康全自動樣本處理與核酸提取工作站各孔道間提取的重復性及對于不同濃度病毒核酸提取的穩(wěn)定性。
2、 評價友康全自動樣本處理與核酸提取工作站對于不同濃度病毒核酸提取的穩(wěn)定性。
二:實驗設計
1、采用友康全自動樣本處理與核酸提取工作站提取病毒的核酸,通過RT-qPCR的檢測方法檢測核酸相對含量,通過各組Ct值大小計算各復孔間的變異系數以判斷孔道間的重復性;對不同的病毒濃度與對應的Ct值進行線性擬合,通過R2的大小判斷儀器提取的穩(wěn)定性。
2、提取病毒的濃度設置6個梯度。每個濃度梯度下設置3個重復,共18個樣本。
3、環(huán)境場所:機器提取在室內封閉無風空間內完成。
三:操作步驟
1、病毒液的配制。取病毒液細胞復制毒原液1mL。分別取200微升加至3個采樣管中,用去600微升。從剩余400μL中取出200μL加至800μL PBS中充分混合,得到1mL病毒稀釋液,命名為1級稀釋液。分別取200微升1級稀釋液加至3個采樣管中,用去600微升。從剩余400μL中取出200μL加至800μL PBS中充分混合,得到1mL病毒稀釋液,命名為2級稀釋液。依次操作,得到3、4、5、6級稀釋液。并且每個級別的稀釋液加至3個采樣管中。共得到18個含有病毒的采樣管,分別標記序號,并做好記錄。每個采樣管中折斷一個拭子進去。
2、儀器所需試劑的配制。共需要三種試劑,分別是異丙醇與磁珠的混合液25mL,純化液50mL,洗脫液15mL。其中異丙醇與磁珠的混合液需要在實驗前1小時之內配制出來。
3、將18個加好病毒的采樣管隨機插入儀器內的孔位并固定好,啟動提取程序,進行提取。
5、熒光定量PCR對各組提取得到的核酸進行檢測。
四:結果的處理及數據分析
1、各組統(tǒng)計Ct值統(tǒng)計分析:
管號 | 病毒液稀釋度 | Ct值 | Ct均值 | 變異系數(CV) |
1 | 5 | 23.92 | 23.83333 | 2.20% |
2 | 24.31 | |||
3 | 23.27 | |||
4 | 52 | 26.53 | 26.40333 | 0.42%
|
5 | 26.32 | |||
6 | 26.36 | |||
7 | 53 | 28.52 | 28.70667 | 1.22%
|
8 | 29.11 | |||
9 | 28.49 | |||
10 | 54 | 30.73 | 31.33667 | 1.70%
|
11 | 31.73 | |||
12 | 31.55 | |||
13 | 55 | 32.58 | 33.4
| 2.26%
|
14 | 34.07 | |||
15 | 33.55 | |||
16 | 56 | 37.08 | 35.74667 | 3.27% |
17 | 34.90 | |||
18 | 35.26 |
2、對病毒濃度的對數值與Ct值之間進行線性擬合結果:
五:實驗結論
1、 相同濃度下的各組復孔間提取得到的核酸變異系數均在5%以下,說明該設備的各孔道間具有較好的重復性。
2、 不同濃度的病毒液利用該設備提取得到的核酸進行PCR,得到的Ct值與病毒濃度對數之間呈現(xiàn)較好的線性關系,R2=0.999,說明該設備對于不同濃度病毒核酸的提取表現(xiàn)穩(wěn)定。
六:友康生物定不負您的選擇
現(xiàn)今的全自動核酸提取市場百家爭鳴,然而大量機構仍然選擇人工或半人工提取,是對全自動集成化產品的不信任,對如此精細化的工作機器能否代替人表示懷疑。友康在病毒樣本處理的細分領域已精耕細作16年,我們了解核酸提取工作的每一個細節(jié),開發(fā)的全自動樣本處理與核酸提取工作站FE4800將會用數萬次測試與實驗證明它的穩(wěn)定性,不負每一位客戶的選擇!