前言:
上期我們驗證了友康的無泡沫病毒采樣管貨真價實的“無泡沫”——經(jīng)劇烈晃動過后基本無泡沫產(chǎn)生,并可在2分鐘內(nèi)即產(chǎn)即消,且不會出現(xiàn)開閉蓋有泡沫溢出的現(xiàn)象。
于是又有客戶問道:“面子”上的事確實證實無誤了,但“里子”中的事呢?無泡沫病毒采樣管的真實性能相比之前版本又如何呢?無泡沫版配方會影響病毒滅活效果和病毒核酸保存效果嗎?
為此我們做出以下兩項實驗驗證,用事實打消您的顧慮——
實驗一:病毒滅活效果評價
一:實驗?zāi)康?/strong>
證明采用無泡滅活型采樣液處理過的病毒失活,不再具有感染細(xì)胞的能力。
二:實驗方案:
1、 活性判斷:將處理后的病毒感染VERO細(xì)胞,觀察感染效果,統(tǒng)計數(shù)據(jù)。
2、 對照:非滅活采樣液處理組作為陰性對照,含泡沫滅活液處理組作為陽性對照組。
3、 病毒材料:采用豬流行性腹瀉病毒(PEDV)減毒疫苗作為病毒材料,病毒滴度為1010copies/mL。
4、 實驗過程:
(1)將病毒原液與采樣液1:1體積比相混合(各1ml),室溫下放置2分鐘。然后加入500倍體積的病毒分離培養(yǎng)基對采樣液進(jìn)行中和。
(2)采用中和完成后的病毒混合液感染VERO細(xì)胞。
(3)將事先培養(yǎng)的VERO細(xì)胞用PBS清洗2遍。然后接種準(zhǔn)備好的病毒于六孔板,每孔500ul病毒液。
(7)病毒孵育2小時,每隔30分鐘從培養(yǎng)箱中取出晃動一次。
(9)孵育結(jié)束后,將病毒液吸去,每孔中加入2ml的病毒分離培養(yǎng)基。(10)將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),35℃,5% CO2。以后每天觀察細(xì)胞生長和病變情況。
三:實驗結(jié)果
四:實驗結(jié)論
采用友康生物的無泡滅活型采樣液處理過的病毒滅活效果顯著。
實驗二:滅活后病毒核酸保存效果評價
一:實驗?zāi)康?/strong>
驗證采用友康無泡滅活型病毒采樣液處理過的病毒樣本,相比原有泡滅活產(chǎn)品,其核酸檢測結(jié)果沒有顯著影響。
二:實驗方案
在1mL滅活采樣液中加入100uL流感病毒,混勻后分為兩份。一份立即提取病毒的核酸并置于-80℃凍存;另一份于室溫下放置48小時后提取病毒的核酸。取各組的核酸進(jìn)行PCR檢測,判斷核酸保存效果情況。
三:實驗結(jié)果
實驗各組Ct值
處理組 | Ct值 |
有泡沫滅活組-0h | 23.14 |
無泡滅活組-0h | 23.43 |
有泡沫滅活組-48h | 23.21 |
無泡滅活組-48h | 23.32 |
四:實驗結(jié)論
1、 病毒加入滅活采樣液后于室溫下放置48小時前后核酸檢測結(jié)果無差異。
2、 有泡組與無泡組之間的核酸檢測結(jié)果無顯著差異。