你知道嗎?核酸檢測結(jié)果,與病毒采樣管的胍鹽濃度和提取方式 緊密相關(guān)!
胍鹽濃度控制不好,很可能導致假陰性情況出現(xiàn),后果不堪設(shè)想哇……
于是友康查閱了大量市場資料,并用科學嚴密的實驗過程做出以下相關(guān)實驗驗證,帶大家探索友康病毒采樣管的又一大優(yōu)勢。
那究竟胍鹽濃度與提取方式對核酸檢測結(jié)果的影響是如何的呢?
一:實驗材料
1、病毒采樣液:原胍鹽滅活采樣液、增加胍鹽2M(中濃度)采樣液、增加胍鹽4M(高濃度)采樣液。
2、病毒濃度:高濃度PEDV病毒(105 copies/mL)、低濃度PEDV病毒(5×103copies/mL)。
3、病毒核酸提取試劑盒:友康生物免裂解核酸提取試劑盒(磁珠法)、G品牌磁珠法核酸提取試劑盒。
二:實驗步驟
1、 將稀釋好的病毒液以1:9的體積比例添加至不同胍鹽濃度的幾種采樣液中,得到104和500 copies/mL的病毒混合液。
2、 分別采用兩種品牌的核酸提取試劑盒對病毒核酸進行提取。
3、對各組病毒核酸進行RT-qPCR檢測,比較各組的Ct值。
三:實驗結(jié)果
G品牌試劑盒提取后各組擴增曲線如下
在高、低兩種不同病毒濃度條件下隨著胍鹽濃度的增大檢出的Ct值顯著變大
友康生物核酸提取試劑盒提取后各組擴增曲線
在高、低兩種不同病毒濃度條件下隨著胍鹽濃度的增大檢出的Ct值無明顯變化
四、實驗結(jié)論
1、病毒采樣液中過高的胍鹽濃度可能會導致核酸檢測環(huán)節(jié)Ct值變大,在不同品牌的提取試劑盒之間數(shù)據(jù)差異更顯著。
2、較低的病毒濃度下,如果采用較高濃度的胍鹽病毒采樣液,再搭配上性能較差的核酸提取試劑盒,可能會導致結(jié)果的假陰性。