一、常用的儀器設(shè)備
(1)儀器
(a)顯微鏡:倒置顯微鏡——是細(xì)胞培養(yǎng)實驗室所必需的日常工作常規(guī)使用設(shè)備之一,便于掌握細(xì)胞的生長情況并觀察有無污染等。
(b)培養(yǎng)箱:體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,大多數(shù)情況下,Z適溫度是37℃,溫差變化一般不應(yīng)超過±0.5℃,細(xì)胞在溫度升高2℃ 時,持續(xù)數(shù)小時即不能耐受,40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的培養(yǎng)箱,如具有較高靈敏度的恒溫培養(yǎng)箱及CO2培養(yǎng)箱。
(c)干燥箱:用于細(xì)胞培養(yǎng)箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。
(d)水純化裝置:細(xì)胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,細(xì)胞培養(yǎng)以及與細(xì)胞培養(yǎng)工作相關(guān)的液體的配制用水必須事先嚴(yán)格純化處理。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時配制各種培養(yǎng)液及試劑等均需使用三次蒸餾水:即使是用于玻璃器皿的沖洗,也應(yīng)使用二次以上蒸餾水。
(e)冰箱:細(xì)胞培養(yǎng)室必須配備。a、普通冰箱或冷藏柜——儲存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hank’s液試劑等培養(yǎng)用的物品及短期保存組織標(biāo)本。b、低溫冰箱(-20℃)——用于儲存需要冷凍保存生物活性及較長時期存放的制劑,如酶、血清等。
(f)細(xì)胞冷凍儲存器:儲存器常用的是液氮容器。根據(jù)使用需要分為不同的類型及多種規(guī)格。選擇購置液氮容器時要綜合考慮容積大小,取放使用方便及液氮揮發(fā)量(經(jīng)濟(jì))三種因素。
(g)離心機(jī):進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時,常規(guī)需要進(jìn)行制備細(xì)胞懸液、調(diào)整細(xì)胞密度、洗滌、收集細(xì)胞等工作,通常需要使用離心機(jī)。一般可常規(guī)配置4000rpm的國產(chǎn)臺式離心機(jī),例如細(xì)胞沉降,使用80~100g的離心機(jī)即可,離心力過大有時可能引起細(xì)胞的損傷。
(h)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各種電子天平。
(i)消毒器:一般為高壓蒸汽滅菌鍋,直接或間接與細(xì)胞接觸的物品均需消毒滅菌處理。
(j)濾器:目前細(xì)胞培養(yǎng)工作中采用的培養(yǎng)用液,包括人工合成培養(yǎng)液、血清、消化用胰酶等常含有維生素、蛋白、多肽、生長因子等物質(zhì),這些物質(zhì)在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能,因而上述液體多采用濾過消毒以除去細(xì)菌。目前常使用的濾器有Zeiss濾器、玻璃濾器和微孔濾器,各種濾器有其使用原理和特點。
(2)器械
主要用于解剖、取材、剪切組織及操作時持取物件。
常用的有:手術(shù)刀或解剖刀、手術(shù)剪或解剖剪(彎剪及直剪),用于解剖動物、分離及切剪組織,制備原代培養(yǎng)的材料;眼科虹膜小剪(彎剪或直剪),用于將組織材料剪成小塊;血管鉗及組織鑷、眼科鑷(彎、直),用于持取無菌物品(如小蓋玻片)夾持組織等;口腔科探針或代用品,用以放置原代培養(yǎng)之組織小塊。
二、特殊設(shè)備
細(xì)胞培養(yǎng)實驗室除了應(yīng)配備上述的基本設(shè)備以外,如有條件,可添置一些特殊或先進(jìn)的儀器設(shè)備,以便更有效、更精確、更深入地進(jìn)行實驗室工作。例如:
(1)酶聯(lián)免疫檢測儀——可用于進(jìn)行免疫學(xué)測定及細(xì)胞毒性、藥物敏感性檢測等。
(2)超低溫冰箱(-80℃)——便于儲存某些試劑及標(biāo)本。
(3)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)器——用于某些特殊細(xì)胞或需要收獲大量細(xì)胞的培養(yǎng)。
(4)熒光顯微鏡——進(jìn)行熒光染色樣本的觀察。
(5)流式細(xì)胞儀——可更精確及快速檢測細(xì)胞。
(6)用于檢測細(xì)胞培養(yǎng)條件的各種儀器,例如專門為快速分析細(xì)胞培養(yǎng)基中主要或關(guān)鍵營養(yǎng)成分、代謝產(chǎn)物及氣體含量設(shè)計的多功能細(xì)胞培養(yǎng)分析儀、手提式CO2濃度測定儀等。