繼復(fù)星凱特、藥明巨諾的CAR-T產(chǎn)品成功上市,南京傳奇的的CAR-T產(chǎn)品成功出海后,免疫類細(xì)胞療法掀起了一股浪潮。然而CAR-T產(chǎn)品的競爭越發(fā)激烈,其本身也伴隨著大量局限性,相比之下NK細(xì)胞治療成為了免疫療法的新風(fēng)向。
NK細(xì)胞培養(yǎng)難度遠(yuǎn)大于T細(xì)胞,受限于血液來源中的NK比例較低且不穩(wěn)定,NK本身的分裂數(shù)量有限等因素,獲得高純度高數(shù)量的NK細(xì)胞困擾著科研人員們。友康生物全新升級的NK細(xì)胞純因子培養(yǎng)套裝4.0,可用于從血液樣本中分離到的單個核細(xì)胞的激活,以及后續(xù)向NK細(xì)胞的誘導(dǎo)及擴(kuò)增培養(yǎng),產(chǎn)品性能如下:
注:以上表格為客觀性能,并不是最佳性能
然而,討論產(chǎn)品性能的同時我們不應(yīng)忘記NK細(xì)胞本身的作用——腫瘤殺傷能力。經(jīng)友康體系培養(yǎng)的NK細(xì)胞是否具備正常的腫瘤殺傷效果,我們將用三期欄目驗(yàn)證。
實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證:
NK細(xì)胞對K562的殺傷
檢測方法:
培養(yǎng)14天左右的NK細(xì)胞與CFSE染色的K562共孵育4h,后檢測K562凋亡率:
1. K562用0.5uM的CFSE染色,37℃孵育10min,完全培養(yǎng)基清洗兩次。
2. 5×104個CFSE染色的K562加入96孔板,以0.5:1, 1:1, and 2:1的效靶比混入NK細(xì)胞。
3. 置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中孵育4h。
4. 將96孔板中的細(xì)胞全部吸出,使用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)。
K562的殺傷率=(接種K562細(xì)胞數(shù)-孵育4h后剩余的K562細(xì)胞)/ 接種K562細(xì)胞數(shù)
檢測結(jié)果:
共孵育4h后,鏡下觀察可見K562細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化:
檢測結(jié)論:
經(jīng)友康體系培養(yǎng)的NK細(xì)胞具備正常且有效的對K562細(xì)胞殺傷效果。