目前NK細(xì)胞培養(yǎng)方法包括使用細(xì)胞因子、化學(xué)試劑以及飼養(yǎng)細(xì)胞,其中細(xì)胞因子在調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的活性中具有核心作用。據(jù)報(bào)道,IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21和IFN-γ被歸類為NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性和增殖的活化細(xì)胞因子,并增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)各種腫瘤的細(xì)胞毒性作用。在實(shí)際操作中,在進(jìn)行NK細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),影響最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素非常多。那么就和小編一起來看看培養(yǎng)期間有哪些需要注意的?
采用TC處理水平較高的貼壁細(xì)胞培養(yǎng)瓶,建議從2個(gè)T25瓶開始培養(yǎng)2L系統(tǒng)套裝。盡量使用大型培養(yǎng)袋,促進(jìn)細(xì)胞間氣體交換,防止代謝廢物過多影響細(xì)胞增殖。如果使用1L培養(yǎng)系統(tǒng),建議使用2L培養(yǎng)袋;采用2L培養(yǎng)系統(tǒng),建議每個(gè)1L系統(tǒng)使用1.8L培養(yǎng)袋。剛進(jìn)袋時(shí),一般細(xì)胞培養(yǎng)袋大,細(xì)胞液體積小。建議將培養(yǎng)袋對(duì)折使用(D7),選擇合適的底面積培養(yǎng)。推薦外周血接種密度為1.5-2E6cells/mL。臍血UCBMC推薦接種密度為2.5-3E6cells/mL。